Keywords: recombinante eiwitexpressie, Pseudomonas, synthetische biologie, microbiële fermentatie.
Pseudomonas putida is een waardevolle gastheer gebleken voor de productie van recombinante eiwitten in de industriële biotechnologie, dankzij zijn zeer veelzijdige metabolisme dat onder andere de teelt met afvalstromen of de productie van toxische verbindingen mogelijk maakt. Het bereiken van hoge opbrengsten aan recombinante eiwitten is echter sterk afhankelijk van de efficiënte overexpressie van het doelgen. In Escherichia coli wordt dit doorgaans bereikt met behulp van het op faag T7 gebaseerde pET-expressiesysteem.
Hoewel het T7 RNA-polymerase (RNAP) een krachtig hulpmiddel is voor synthetische biologie en eiwitproductie in verschillende microbiële gastheren, is de toepassing ervan in Pseudomonas ernstig beperkt vanwege cytotoxische effecten.
We hebben pPUT ontwikkeld, een geoptimaliseerd expressiesysteem dat specifiek is afgestemd op Pseudomonas-soorten. Dit systeem maakt een robuuste overexpressie van recombinante eiwitten mogelijk, met een dynamisch expressiebereik dat tot 200 keer zo groot is. Bovendien bevat pPUT een gastheer-RNAP-remmer die de celgroei effectief loskoppelt van de productvorming, wat resulteert in een verdere toename van 20% in de eiwitopbrengst.
Onze technologie is breed toepasbaar in microbiële fermentaties en daarbuiten. Het pPUT-systeem maakt de ontwikkeling mogelijk van metabolisch veelzijdige en robuuste bacteriële productiehosts, die een aantrekkelijk alternatief bieden voor E. coli zonder dat een overstap naar (duurdere en complexere) eukaryote modelsystemen nodig is.
Deze technologie is ontwikkeld aan KU Leuven in het Laboratorium voor Gentchnologie onder leiding van professor Rob Lavigne. We zijn op zoek naar geïnteresseerde industriële partners om mee samen te werken en/of een licentie te nemen op de aangeboden technologie. We zijn zeker bereid om u een meer uitgebreide presentatie van de technologie te geven.
Duik in het onderzoeksportaal en ontdek alle mogelijkheden.
